Cum se face reproducerea consecventă: 9 pași

În chimie, diluția se numește procesul, ca rezultat al concentrației substanței este redusă în soluție. Diluția secvențială constă în diluții repetate, care vă permite să reduceți rapid concentrația inițială. Această metodă este utilizată în experimentele în care sunt necesare soluții foarte diluate cu o concentrație exactă, adesea determinată de o scală logaritmică sau când este necesar să se găsească densitatea bacteriilor. Creșterea secvențială este utilizată pe scară largă în științele experimentale, cum ar fi biochimia, microbiologia, farmacologia, fizica.

Pași

Metoda 1 din 2:

Diluare secvențială

unu. Alegeți un solvent adecvat. La reproducere este foarte important să alegeți solventul drept sau tampon. Multe soluții pot fi disociate cu apă distilată, dar nu este întotdeauna așa. Dacă diluați bacterii sau alte celule, veți avea nevoie de mediul cultural adecvat. Tamponul selectat trebuie utilizat cu toate diluțiile succesive.

Dacă nu sunteți sigur că este mai bine să utilizați ca un tampon, întrebați profesorul sau căutați informațiile necesare pe Internet: Poate că cineva a pregătit deja o astfel de soluție.

Imagine denumită diluții seriale Pasul 2

2. Pregătiți mai multe tuburi cu tampon de 9 mililitri. Aceste tuburi de testare vor juca rolul de spații de reproducție. Afișați modelul diluat în primul tub de testare și apoi transferă secvențial soluția în următoarele tuburi de testare.

Înainte de a începe lucrul, este util să marcați toate tuburile de testare utilizate astfel încât să nu confundăm soluțiile în procesul de reproducere.

Fiecare tub de testare următor va conține o soluție de 10 ori mai puțin concentrată decât cea anterioară. În primul tub de testare, concentrația soluției va fi 1:10, în al doilea - 1: 100, în a treia - 1: 1000 și așa mai departe. Determinați în avans câte diluții aveți nevoie și pregătiți numărul corespunzător de tuburi.

Imagine denumită diluții seriale Pasul 3

3. Pregătiți un tub de testare cu cel puțin 2 mililitri de soluții nediluate. Pentru o diluție consistentă, această metodă necesită cel puțin 1 mililitare a unei soluții nediluate. Dacă există doar 1 mililitru, nu veți avea o soluție nedivizată. Scrieți pe acest tub de testare Nr (soluție nedezvoltată).

Înainte de fiecare reproducere, amestecați bine soluția.

Imagine denumită diluții seriale Pasul 4

4. Petreceți prima reproducere. Tipul 1 mililitru de nediluat cu tuburi de testare într-o pipetă Nr și spargeți-l în tubul de testare cu un semn 1:10, care conține 9 mililitri de tampon, după care amestecați cu atenție. Ca rezultat, veți obține o soluție, diluată cu 9 mililitri de tampon. Astfel, concentrația soluției va scădea în 10 ori.

Imagine denumită diluțiile seriale Pasul 5

cinci. Pregătiți următoarea soluție. Pentru a doua reproducere consecventă, luați 1 mililitru de soluție din tubul de testare 1:10 și adăugați la 9 mililitri tampon în tubul de testare 1: 100. Anterior, amestecați soluția în tubul de testare 1:10. După ce adăugați o soluție într-un tub de testare 1: 100, Se amestecă bine conținutul. Ca rezultat, ați reproșat o soluție dintr-un tub de testare 1:10, Și veți avea o soluție nouă cu o concentrație de 1: 100.

Imagine denumită diluții seriale Pasul 6

6. Dacă este necesar, continuați să reproduceți o soluție. Acest proces poate fi repetat la fel de mult cum nu atingeți concentrația dorită. Dacă experimentul ar trebui să determine dependența de concentrare, este posibil să se pregătească secvențial soluții 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.

Metoda 2 din 2:

Calculul coeficientului de reproducere și concentrare finală

unu. A determina coeficient Diluarea soluției finale. Pentru a face acest lucru, multiplicați toți coeficienții de reproducere succesivi. Formula corespunzătoare are următoarea formă: D_T = D_unu X D₂ X D₃ X ... X D_N, Unde D_T - Coeficientul comun de reproducere, D_N - Coeficientul de diluare N-TH.

Să presupunem că de 4 ori a efectuat reproducerea cu un raport de 1:10. Înlocuiți acest coeficient în formula și obțineți d_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Astfel, după ultima reproducere în cel de-al patrulea tub de testare, o soluție este 1:10.000, adică soluția finală va fi în 10.000 mai puțin concentrate decât originalul (nedezvoltat).

Imagine intitulată Diluțiile seriale Pasul 8

2. Determină concentrația soluției după reproducere. Pentru a determina concentrația soluției după o reproducere consecventă, este necesar să se cunoască concentrația inițială. Utilizați formula C_Finit = C_Sursă/ D, Unde C_Finit - Concentrarea soluției divorțate, C_Sursă - Concentrația originală, D - determinat deasupra coeficientului de reproducere.

Exemplu: dacă concentrația soluției inițiale a fost de 1.000.000 celule pe mililitru, iar coeficientul de reproducere este de 1.000, ceea ce este egal cu concentrația soluției finale?

Folosim formula:

C_Finit = C_Sursă/ D

C_Finit = 1.000.000/1.000

C_Finit = 1.000 de celule pe mililitru.

Imagine denumită diluții seriale Pasul 9

3. Verificați dimensiunea. Când efectuați orice calcule, trebuie să vă asigurați că ați primit unitățile potrivite de măsurare. Dacă ați pornit de la numărul de celule pe mililitru, asigurați-vă că rezultatul este obținut și în aceste unități. Dacă sunteți calculat în PPM (ppm), concentrația rezultată trebuie, de asemenea, să fie exprimată în PROMILL.